共培養や気液界面培養に「透過性コラーゲン膜」

概要

透過性コラーゲン膜は、物質透過性を有する膜状のアテロコラーゲンスキャフォールド（足場材料）です。特に、初代上皮系細胞の培養に効果を発揮します。プラスチックやガラスの培養器材を用いる従来の細胞培養は、細胞極性を考慮した培養方法ではありませんが、透過性コラーゲン膜を用いることで、従来の培養皿では不可能な細胞に極性を持たせた培養が可能です。また、細胞間相互作用の研究にも使用可能です。

用途

膜上培養
気液界面培養
共培養
細胞シート移植

特長

膜上に上皮系細胞を培養した場合、コラーゲン膜を介して栄養物の吸収および代謝産物の排出を行い、極性を持たせることができます。
透明度が高い膜であるため、培養中の細胞の顕微鏡観察が容易です。
2種類の異なった細胞を膜の表裏に培養できるので、細胞同士を接触させずに細胞間相互作用を研究できます。
生分解性があるため、細胞シートの移植にも使用できます。

コラーゲンの種類

ウシ皮由来アテロコラーゲン

仕様

	CM-6	CM-24
用　途	6wellプレート用	24wellプレート用
容　積	2,860mm³	470mm³
面　積	530mm²	64mm²
フレームの材質	ポリスチレン樹脂	ポリスチレン樹脂

製品番号製品包装価格

製品番号	製品	包装	価格
~~MEN-01~~	~~透過性コラーゲン膜 50mmディッシュ用　無菌~~ ~~Atelocollagen, Permeable Membrane for 50 mm culture dish~~ 本製品は2024年2月27日をもって終売いたしました。	~~5個/箱~~	~~¥19,500~~ ~~(税込¥21,450)~~
CM-6	透過性コラーゲン膜 6wellプレート用　無菌 Atelocollagen, Permeable Membrane for 6-well Culture Plate *2024年1月より包装、価格を変更致しました。	12個/箱^*	¥41,000^* (税込¥45,100)
CM-24	透過性コラーゲン膜 24wellプレート用　無菌 Atelocollagen, Permeable Membrane for 24-well Culture Plate	24個/箱	¥38,500 (税込¥42,350)

~~MEN-01~~

~~透過性コラーゲン膜 50mmディッシュ用　無菌~~
~~Atelocollagen, Permeable Membrane for 50 mm culture dish~~

本製品は2024年2月27日をもって終売いたしました。

~~5個/箱~~

~~¥19,500~~
~~(税込¥21,450)~~

CM-6

透過性コラーゲン膜 6wellプレート用　無菌
Atelocollagen, Permeable Membrane for 6-well Culture Plate

*2024年1月より包装、価格を変更致しました。

12個/箱^*

¥41,000^*
(税込¥45,100)

CM-24 透過性コラーゲン膜 24wellプレート用　無菌
Atelocollagen, Permeable Membrane for 24-well Culture Plate 24個/箱 ¥38,500
(税込¥42,350)

保管方法：冷凍（-20℃）　本品は研究用試薬です。
代理店への仕切り価格は、家田化学薬品株式会社（03-3816-1871）へご確認ください。

使用事例

使用事例
使用事例2
使用事例3
使用事例4
使用事例5

透過性コラーゲン膜を用いた腎オルガノイドの膜上培養

低接着プレートを用いて再構成された腎オルガノイドをコラーゲン膜上で気液界面培養したところ、広範な尿管芽の分枝やその周囲の血管ネットワーク、多数の糸球体の形成が観察された。一方、細動脈はほぼ観察されず、血管内皮細胞も腎臓間質にのみ存在し、糸球体との一体化は認められなかった。以上のことから、一定の限度はあるものの本再構成の手法やコラーゲン膜上での気液界面培養により、血管構造を持つ腎オルガノイドの作製が可能であることを示した。
[出典：Sci Rep. 2019 Feb 4;9(1):1172. Created by modifying figures 3A and 3C-G. ©Murakami Y., et al. 2019(Licensed under CC BY 4.0) https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/]
透過性コラーゲン膜を用いたエナメル芽細胞の分化誘導

コラーゲン膜の片面にラット歯原性上皮細胞株(HAT-7)、もう一方の面にウシ歯小嚢細胞株(BCPb8)を播種し、SWを行ったところ、コラーゲン膜上でHAT-7の単独培養を行った場合およびSCに比べて、エナメル形成に重要なAmeloblastinの発現亢進が観察された。また、同様にAmelogeninの発現亢進も確認され、コラーゲン膜の物質透過性が生体内の細胞間相互作用の再現に有用であることが示された。（In Vitro Cell Dev Biol Anim. 2011 47(1):39-44.）
(データ提供：国立研究開発法人物質・材料研究機構機能性材料研究拠点　谷口彰良上席研究員）
透過性コラーゲン膜を用いたがん細胞と線維芽細胞の共培養

コラーゲン膜を用いてHCC1937 、MCF-7、SK-BR-3 の3 種の乳がん細胞をそれぞれ線維芽細胞と共培養し、マイクロアレイにて遺伝子発現の変化を評価した。その結果、HCC1937 細胞で発現が増加あるいは低下した上位100 の遺伝子について、線維芽細胞では前者の内77% の遺伝子が反対に発現低下し、後者の内82% の遺伝子が反対に発現増加するなど、共培養による相互的な作用が示された。また、各乳がん細胞はいずれも好気的代謝の方向にリプログラムされる一方、線維芽細胞もWarburg 表現型の方向にリプログラムされることが示唆され、コラーゲン膜は非接触共培養による細胞間相互作用の評価に有用であった。
[出典：Biomed Res Int. 2015;2015:960840. Created by modifying figure 1 and Tables 5-6. ©Ueno T., et al. 2015 (Licensed under CC BY 3.0)
https://creativecommons.org/licenses/by/3.0/]
透過性コラーゲン膜を用いた角膜内皮細胞の分化誘導・移植

角膜間質細胞から多分化能を持つcornea-derived precursorsをマウスおよびヒトから分離し、コラーゲン膜上にて機能的な角膜内皮細胞への分化誘導を行った。また、角膜内皮細胞層を除去したドナー角膜に、コラーゲン膜ごとTECEを接着させ、移植した群では、対象群と比べ、角膜の膨潤を抑制すると共に角膜の透明性を顕著に向上させた。これらのことから、コラーゲン膜の高い透明度および生体適合性が角膜移植などの生体移植に適していると示された。（Stem Cells Dev. 2013 22(5):828-839.）
(データ提供：慶應大学医学部眼科学　羽藤晋特任講師）
透過性コラーゲン膜を用いた細胞極性のある培養

コラーゲン膜を用いた培養により、basal側の培地中グルコース消費量および乳酸分泌量は、apical側より顕著に高くなることが観察された。一方、basal側に対してapical側のpH低下が観察されたが、培地中に膜輸送体阻害剤を添加すると、pH差が減少した。これらのことから、コラーゲン膜での培養は細胞極性を持たせるとともに、機能的な膜輸送機構を保つことが可能であった。
［出展：Yoshizato K, et al. J Cell Sci. 91(Pt 4):491-499.］

参考文献

CM-6/24共培養
CM-6/24細胞シート移植
CM-6/24膜上培養・その他
MEN-01共培養
MEN-01細胞シート移植・膜上培養・その他

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  骨肉腫細胞スフェロイドと血管内皮細胞の両面培養。
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  コラーゲン膜の裏面へPDMAディスクをはめ込み、表面へ胆管上皮細胞や肝芽細胞、MEFを播種し、胆管様構造体を形成。その後、裏面に肝細胞を播種して共培養。
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  コラーゲン膜をキャリアーにした心筋細胞シートのラット心筋傷害部への移植。
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  血管内皮細胞のコラーゲン膜上培養。
- Luteinizing Hormone Facilitates Antral Follicular Maturation and Survival via Thecal Paracrine Signaling in Cattle.
  Hattori K, Orisaka M, Fukuda S, Tajima K, Yamazaki Y, Mizutani T, Yoshida Y.
  Endocrinology. 2018 Jun 1;159(6):2337-2347. PMID: 29668890
  卵巣莢膜細胞と顆粒膜細胞の両面培養。
- Long-term culture of human odontoma-derived cells with a Rho kinase inhibitor.
  Uzawa K, Kasamatsu A, Saito T, Takahara T, Minakawa Y, Koike K, Yamatoji M,
  Nakashima D, Higo M, Sakamoto Y, Shiiba M, Tanzawa H.
  Exp Cell Res. 2016 Sep 10;347(1):232-40. PMID: 27514999
  歯牙腫由来細胞と皮膚線維芽細胞あるいは歯髄由来細胞との共培養。
- Characteristic Gene Expression Profiles of Human Fibroblasts and Breast Cancer Cells in a Newly Developed Bilateral Coculture System.
  Ueno T, Utsumi J, Toi M, Shimizu K.
  Biomed Res Int. 2015;2015:960840. PMID: 26171396
  乳がん細胞と線維芽細胞の両面培養。
- Induction of insulin-like growth factor 2 expression in a mesenchymal cell line co-cultured with an ameloblast cell line.
  Matsumoto A, Harada H, Saito M, Taniguchi A.
  In Vitro Cell Dev Biol Anim. 2011 Oct;47(9):675-80. PMID:21959847
  歯原性上皮細胞と歯小嚢細胞の両面培養。
- Induction of enamel matrix protein expression in an ameloblast cell line co-cultured with a mesenchymal cell line in vitro.
  Matsumoto A, Harada H, Saito M, Taniguchi A.
  In Vitro Cell Dev Biol Anim. 2011 Jan;47(1):39-44. PMID:21082283
  歯原性上皮細胞と歯小嚢細胞の両面培養。
- Effects of ovarian theca cells on granulosa cell differentiation during gonadotropin-independent follicular growth in cattle.
  Orisaka M, Mizutani T, Tajima K, Orisaka S, Shukunami K, Miyamoto K, Kotsuji F.
  Mol Reprod Dev. 2006 Jun;73(6):737-44. PMID: 16541462
  卵巣莢膜細胞と顆粒膜細胞の両面培養。
- Effects of cryopreservation on histology and viability of cultured corneal epithelial cell sheets in rabbit.
  Kito K, Kagami H, Kobayashi C, Ueda M, Terasaki H.
  Cornea. 2005 Aug;24(6):735-41. PMID: 16015095
  線維芽細胞と角膜上皮細胞の両面培養。
- Altered Keratinocyte-Fibroblast Interactions in Psoriasis Revealed by a Combined Cell-Culture.
  菊池朋子、三橋善比古、松崎康司、金子高英、中野創、武田仁志、森次龍太、花田勝美
  弘前醫學 2004. 56(1), 1-8.
  角化細胞と線維芽細胞の両面培養。
- Effects of ovarian theca cells on apoptosis and proliferation of granulosa cells: changes during bovine follicular maturation.
  Tajima K, Orisaka M, Hosokawa K, Amsterdam A, Kotsuji F.
  Biol Reprod. 2002 Jun;66(6):1635-9. PMID: 12021041
  卵巣莢膜細胞と顆粒膜細胞の両面培養。
- Role of ovarian theca and granulosa cell interaction in hormone productionand cell growth during the bovine follicular maturation process.
  Yada H, Hosokawa K, Tajima K, Hasegawa Y, Kotsuji F.
  Biol Reprod. 1999 Dec;61(6):1480-6. PMID: 10569992
  卵巣莢膜細胞と顆粒膜細胞の両面培養。
- Psoriatic fibroblasts enhance cornified envelope formation in normal keratinocytes in vitro.
  Ishikawa H, Mitsuhashi Y, Takagi Y, Hashimoto I.
  Arch Dermatol Res. 1997 Aug;289(9):551-3. PMID: 9341977
  角化細胞と線維芽細胞の両面培養。
- Effect of interactions between granulosa and thecal cells on meiotic arrest in bovine oocytes.
  Kotsuji F, Kubo M, Tominaga T.
  J Reprod Fertil. 1994 Jan;100(1):151-6. PMID: 8182583
  卵巣莢膜細胞と顆粒膜細胞の両面培養。
- Simultaneous and separated culture of keratinocytes and fibroblasts on each side of a collagen membrane.
  Mitsuhashi Y, Mikami Y, Mikami H, Ishikawa H, Tamai K, Hashimoto I.
  J Dermatol Sci. 1993 Feb;5(1):3-13. PMID: 8485110
  角化細胞と線維芽細胞の両面培養。
- Bovine theca and granulosa cell interactions modulate their growth, morphology, and function.
  Kotsuji F, Kamitani N, Goto K, Tominaga T.
  Biol Reprod. 1990 Nov;43(5):726-32. PMID: 2291908
  卵巣莢膜細胞と顆粒膜細胞の両面培養。
- [An attempt of in vitro portal invasion model of hepatocellular carcinoma utilizing permeable collagen membrane]. [Article in Japanese]
  Ichida T, Miyagiwa M, Okada K, Hata K, Sasaki H, Asakura H.
  Hum Cell. 1989 Jun;2(2):165-72.PMID:2562088
  血管内皮細胞と肝がん細胞の両面培養。
- Multilayered Human Skeletal Muscle Myoblast Sheets Promote the Healing Process After Colonic Anastomosis in Rats.
  Nakamura T, Yokoyama U, Kanaya T, Ueno T, Yoda T, Ishibe A, Hidaka Y, Umemura M, Takayama T, Kaneko M, Miyagawa S, Sawa Y, Endo I, Ishikawa Y.
  Cell Transplant. 2021 Jan-Dec;30:9636897211009559. PMID: 33880968.
  コラーゲン膜をフィブロネクチンでコーティングし、筋芽細胞の播種と静水圧負荷を繰り返し、多層細胞シートを作製。
- Strong adhesiveness of a new biodegradable hydrogel glue, LYDEX, for use on articular cartilage.
  Kazusa H, Nakasa T, Shibuya H, Ohkawa S, Kamei G, Adachi N, Deie M, Nakajima N, Hyon SH, Ochi M.
  J Appl Biomater Funct Mater. 2013 Dec 16;11(3):e180-6. PMID: 24127035
  ブタ関節軟骨とコラーゲン膜を接着させて引張試験。また、膝蓋骨とコラーゲン膜を接着させて細胞毒性を評価。
- Promotion of angiogenesis by an artificial extracellular matrix protein containing the laminin-1-derived IKVAV sequence.
  Nakamura M, Yamaguchi K, Mie M, Nakamura M, Akita K, Kobatake E.
  Bioconjug Chem. 2009 Sep;20(9):1759-1764. PMID: 19689157
  laminin-1由来IKVAV配列を持つ融合タンパク質EREI2CBDをコラーゲン膜に添加し、鶏卵漿尿膜上に貼り付けCAMアッセイ。
- Puromycin aminonucleoside induces apoptosis and increases HNE in cultured glomerular epithelial cells.
  Suzuki T, Takemura H, Noiri E, Nosaka K, Toda A, Taniguchi S, Uchida K, Fujita T, Kimura S, Nakao A.
  Free Radic Biol Med. 2001 Sep 1;31(5):615-23. PMID: 11522446
  糸球体上皮細胞のコラーゲン膜上培養。
- An adenosine deaminase inhibitor prevents puromycin aminonucleoside nephrotoxicity.
  Nosaka K, Takahashi T, Nishi T, Imaki H, Suzuki T, Suzuki K, Kurokawa K, Endou H.
  Free Radic Biol Med. 1997;22(4):597-605. PMID: 9013123
  糸球体上皮細胞のコラーゲン膜上培養。
- Ability of various inserts to promote endothelium cell culture for the establishment of coculture models.
  Villars F, Conrad V, Rouais F, Lefebvre F, Amédée J, Bordenave L.
  Cell Biol Toxicol. 1996 Dec;12(4-6):207-14. PMID: 9034610
  血管内皮細胞のコラーゲン膜上培養。
- Ketoconazole activates Cl- conductance and blocks Cl- and fluid absorption by cultured cystic fibrosis (CFPAC-1) cells.
  Kersting U, Kersting D, Spring KR.
  Proc Natl Acad Sci U S A. 1993 May 1;90(9):4047-51. PMID: 7683418
  膵臓がん細胞のコラーゲン膜上培養。
- Functionally polarized layers formed by epidermal cells on a permeable transparent collagen film.
  Yoshizato K, Nishikawa A, Taira T.
  J Cell Sci. 1988 Dec;91 ( Pt 4):491-9. PMID: 3255753
  上皮細胞のコラーゲン膜上培養

AteloCell^®Collagen for Cell Culture

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透過性コラーゲン膜
Atelocollagen, Permeable Membrane

概要

用途

特長

コラーゲンの種類

仕様

使用事例

透過性コラーゲン膜を用いた腎オルガノイドの膜上培養

透過性コラーゲン膜を用いたエナメル芽細胞の分化誘導

透過性コラーゲン膜を用いたがん細胞と線維芽細胞の共培養

透過性コラーゲン膜を用いた角膜内皮細胞の分化誘導・移植

透過性コラーゲン膜を用いた細胞極性のある培養

参考文献

AteloCell®Collagen for Cell Culture

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透過性コラーゲン膜Atelocollagen, Permeable Membrane

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用途

特長

コラーゲンの種類

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使用事例

透過性コラーゲン膜を用いた腎オルガノイドの膜上培養

透過性コラーゲン膜を用いたエナメル芽細胞の分化誘導

透過性コラーゲン膜を用いたがん細胞と線維芽細胞の共培養

透過性コラーゲン膜を用いた角膜内皮細胞の分化誘導・移植

透過性コラーゲン膜を用いた細胞極性のある培養

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